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小鼠神經(jīng)肽Y（NP-Y）ELISA試劑盒原理

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價格： 4900

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采購度：158 原產(chǎn)地：美洲

發(fā)布時間：2018/3/20 17:14:49

產(chǎn)品簡介：小鼠神經(jīng)肽Y（NP-Y）ELISA試劑盒原理用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠神經(jīng)肽Y（NP-Y）的含量。

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標(biāo)簽：NP-Y試劑盒 小鼠神經(jīng)肽Y ELISA試劑盒原理

詳細(xì)信息

小鼠神經(jīng)肽Y（NP-Y）elisa試劑盒原理

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠神經(jīng)肽Y（NP-Y）的含量。
有效期：6個月
保存條件：2-8℃
本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被小鼠神經(jīng)肽Y（NP-Y）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠神經(jīng)肽Y（NP-Y）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

小鼠神經(jīng)肽Y（NP-Y）elisa試劑盒原理樣品采集：
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本，儲存在4℃?zhèn)溆�，如有特殊原因需要周期收集�?biāo)本，將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

小鼠神經(jīng)肽Y（NP-Y）ELISA試劑盒原理操作步驟
ELISA試驗時，注意事項如下：
1.正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2.在ELISA中，進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
(1)固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的*適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg／ml等)進(jìn)行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
(3)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4)酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。
“產(chǎn)品”客戶須知
1、液體類標(biāo)本（細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等）；
2、樣本保存：請盡早檢測，2-8℃保存一天；需更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集樣本，請將樣本及時分裝標(biāo)號后，置-20℃或-70℃保存；
3、請?zhí)崆案嬖V我們：您樣本的種屬、樣本數(shù)量、待測指標(biāo)及其他特殊要求。
試劑盒報告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)
1、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線；
2、詳細(xì)的實驗步驟；
3、完整的實驗報告（試劑耗材，實驗方法，實驗結(jié)果及結(jié)果說明）；
4、實驗進(jìn)行階段，我公司客服人員會及時向您匯報實驗進(jìn)程。
5、本產(chǎn)品是否開具增票普票請致電我司業(yè)務(wù)員。
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更新時間：2024/9/19 9:16:31

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