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2024實驗指南:ELISA樣本的處理注意事項

點擊次數(shù)：12313 發(fā)布時間：2024/3/5 10:04:34

ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。對于ELISA樣本的處理有很多小伙伴還不是很清楚，恒遠(yuǎn)生物為大家總結(jié)如下，希望對您的實驗有所幫助。

ELISA的檢測目的是為了實驗提供準(zhǔn)確的實驗依據(jù)，為了實驗數(shù)據(jù)的可靠性，在實驗過程中必須堅持質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制，在收集標(biāo)本都必須有一個完整的計劃。

注意事項

1、每個樣本量收集體積=100ulx檢測種類，如果要做復(fù)孔，標(biāo)本量收集體積=100ulx檢測種類x2。

2、樣本收集后若在一周內(nèi)進(jìn)行檢測可保存于2-8°C，若不及時檢測，請進(jìn)行分裝，凍存于-20°或-80°C，避免反復(fù)凍融。

3、試劑盒的檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍，建議實驗通過相關(guān)文獻(xiàn)預(yù)估樣本中待測物的濃度并通過預(yù)實驗確定樣本。

4、血清標(biāo)本采集是應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解是會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。

5、為了確保尿液檢測的準(zhǔn)確性，必須正確收集尿液標(biāo)本和保存，收集尿液的容器必須要清潔干燥，使用一次性的容器，避免因用藥并清潔不到而造成的污染，尿液樣本必須新鮮，留取后，應(yīng)及時檢測或保存。

6、標(biāo)本宜在新鮮是檢測如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中可能發(fā)生聚合，間接法ELISA中樂視本底加深。

7、反復(fù)凍融會使蛋白效價降低，所以待測樣本如需多次檢測，宜少量分裝凍存。

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原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司