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樣本ELISA試劑盒的收集方法

點擊次數(shù):12694   發(fā)布時間:2015/8/19 14:23:16

 在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。新鮮標本應(yīng)盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,應(yīng)及時儲存在4℃?zhèn)溆。如因特殊原因需要定期、多次收集標本,請取材后,將標本及時分裝后放在-20℃或以下條件下保存。由于蛋白樣品多不穩(wěn)定,極易降解,應(yīng)避免反復(fù)凍融,以減少對實驗的影響。
1.液體類標本
液體類標本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(pH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2.組織標本:
采集標本后,稱取組織凈重,用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。標本融化后要保存?-8℃的溫度,加入一定量的PBS(pH7.2-7.4),用手工或電動勻漿器將標本充分勻漿。4℃離心(10000-15000轉(zhuǎn)/分)10-20分鐘。收集上清,留取適量檢測,其余冷凍保存?zhèn)溆谩?/span>
備注:如果樣本中的待檢物需要提純,請客戶自行處理。

原創(chuàng)作者:上海恒遠生物科技有限公司

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